Standardizirano ravnanje, fiksacija in transport vzorcev biopsije dojke

https://www.mayoclinic.org/tests-procedures/breast-biopsy/about/pac-20384812

Visoka{0}}kakovostbiopsija dojkeni odvisna samo od radiologove natančnosti, temveč tudi od patologovega standardiziranega ravnanja z vzorci. Vsak korak od ekstrakcije tkiva do priprave preparata lahko vpliva na končno diagnozo. Ta članek opisuje potovanje vzorca in podrobno opisuje, kako zagotoviti, da vsak vzorec zagotavlja natančne diagnostične informacije.

1. Pridobivanje vzorca in začetni pregled

Po sprožitvi klinik odpre zarezo igle, da pridobi dragoceni vzorec-drobno, običajno sivkasto-belo ali rumenkasto vrvici-podobno jedro tkiva.

• Grob pregled:Najprej ocenite integriteto. Idealna jedra CNB so valjasta, dolga 1–1,5 cm, premer ~1–2 mm. Razdrobljeni, zrnati vzorci lahko kažejo na slabo ciljanje (npr. središče kalcifikacije) ali tehnične težave.
• Preverjanje količine:Zabeležite število pridobljenih jeder. Za podporo rutinske histologije, imunohistokemije in potencialnega molekularnega testiranja so potrebna najmanj 3–4 jedra.

2. Hitra in ustrezna fiksacija: najpomembnejši pomen

Fiksacija je prvi in ​​najpomembnejši kemični korak pri obdelavi vzorca. Hitro ubija celice, koagulira beljakovine, preprečuje avtolizo/gnitje in optimalno ohranja mikroarhitekturo.

• Izbira fiksativa:​ 10% nevtralni puferirani formalin (NBF)je absolutni standard. Odlična penetracija, enotna fiksacija, dobro obarvanje jedra/citoplazme.Nikoliuporabite alkohol, glutaraldehid ali druge ne-standardne raztopine.
• Čas:Vzorce je treba namestiti v fiksativtakojob ekstrakciji. Zakasnjena fiksacija povzroči razgradnjo DNK, kar ogroža IHC in molekularne rezultate.
• Razmerje volumna:Fiksativen volumen mora biti4-10 kratvolumen vzorca. Kritično za majhna jedra. Nezadosten fiksativ izčrpa pufersko kapaciteto, zniža pH, zakisa tkivo in uniči antigenost.
• Trajanje:Idealna fiksacija:6–48 ur. Pod-fiksacijo (<6h) causes soft, difficult-to-section tissue. Over-fixation (>72h) tvega "maskiranje antigena", kar poslabša barvanje IHC.

3. Standardiziran transportni protokol

• Vsebnik:​ Te-tesne, varno zaprte posode za vzorce.
• Označevanje:​ Oznake morajo vključevati ime bolnika, ID, mesto biopsije (leva/desna dojka, kvadrant), vrsto vzorca (CNB/VAB), datum in zdravnika, ki je naročil. Dvoumno označevanje je glavni vzrok za-mešanje vzorcev.
• Obrazec za zahtevo:Patologov primarni vir kliničnih informacij. Obvezne podrobnosti: klinični izvidi, opis slikanja (kategorija BI-RADS), predhodna anamneza/operacija dojk, hormonska terapija in opomba o kratkem postopku.

Prevoz:Zavarujte posode v namenske nosilce, da preprečite razlitja. Izogibajte se močnemu stresanju med prevozom, da ohranite strukturo krhkega tkiva.

4. V-laboratorijski obdelavi

• Prejem in preverjanje:​ Patološko osebje ponovno -preveri oznako vzorca glede na podatke o zahtevku.
• Dehidracija in čiščenje:​ Avtomatizirani procesorji tkiv vodijo vzorce skozi stopnjevane alkohole (dehidracija), ksilen (bistrenje) in staljeni parafinski vosek (~12–16 ur).
• Vdelava:Infiltrirano tkivo je orientirano v staljenem vosku znotraj kalupa, ohlajeno, da se oblikuje parafinski blok.Kritično za jedra:Usmerite trak tkivapravokotno​ na ploskev bloka, da poveča-prečni prerez na diapozitivih.
• Rezanje in barvanje:​Mikrotom izreže rezine 4–5 μm iz bloka, jih namesti na stekelca, obarva s hematoksilinom in eozinom (H&E) in pokrovna stekelca. Patologi pregledujejo pod svetlobnim mikroskopom.

5. Posebne okoliščine

• Sum na limfom:Prihranite sveže tkivo ali uporabite specializirane fiksative (npr. RNApozneje) za pretočno citometrijo/genetske študije.
• ER/PR testiranje:Zelo občutljiv na čas/temperaturo fiksacije; strogo upoštevanje protokolov je obvezno.
• Testiranje HER2:​ Če je IHC 2+, je potrebna potrditev FISH; zahteva najvišje standarde kakovosti pritrditve.

Zaključek:Natančno patološko poročilo se začne z biopsijo, je odvisno od fiksacije in doseže vrhunec s strokovno mikroskopijo. Tesno sodelovanje med kliničnimi zdravniki in patologi, skupaj s strogo standardizacijo celotne pred-analitične faze, tvori temelj natančne diagnoze bolezni dojk.